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預固定不動難題
染色前固定不動體細胞對流式的結果危害極大
大家一般由于下列幾類緣故采用先向體細胞固定不動,隨后開展流式的試驗:便捷(許多 試驗一天沒法做了)、安全性(有生物毒性的樣版務必固定不動殺掉體細胞后開展試驗)及其胞內染色。殊不知固定不動會更改蛋白的表位,導致結果不精i確,乃至不正確。大家查看材料發覺Biolegend企業干了很多的試驗,工業級多聚甲醛批發,較為了不固定不動和固定不動(4%多聚甲醛)對流式的染色結果的危害。
工業級多聚甲醛
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醛基與抗原體蛋白質的羥基化學交聯產生羧甲基,工業級多聚甲醛供應商,使抗原決定簇的三維構象出現室內空間阻礙。分子結構間化學交聯產生的網格圖構造很有可能一部分或徹底遮蓋一些抗原決定簇,使之不可以充足曝露,可導致假陰性的上色,危害免i疫組化結果。因而,4%多聚甲醛固定不動的細胞或組織試品在開展免i疫組化檢驗時,有時候必須抵抗原來開展修補,隨后才可以開展免i疫染色等事后實際操作。工業級多聚甲醛
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疑難問題:
用偶聯劑如多聚甲醛固定不動蛋白相比溶劑能能夠更好地維持細胞構造,殺菌滅藻添加劑固體甲醛,但很有可能減少一些細胞成分的抗原性。經多聚甲醛固定不動后,與胞內隨意羥基融合的抗i體或許已不鑒別這種抗原。假如抗i體在別的試驗中實際效果優良,福州工業級多聚甲醛,但在經多聚甲醛固定不動的標本中不可以合理地功效,能夠試著逐漸減少多聚甲醛的濃度值。那樣盡管使細胞內各成份的化學交聯水平減少,但有益于細胞構造的維持,能夠使抗i體能夠更好地與抗原中的一些緊密連接觸碰。
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